Antimicrobial activity of Er, Cr: YSGG and Ultrasonic on E. faecalisbiofilm in the mesial root canal systems of lower molars / Atividade antimicrobiana de Er, Cr: YSGG e Ultrassônico no biofilme de E. faecalis nos sistemas de canais radiculares mesiais de molares inferiores

The internal topography of the root canal is complex, especially for the permanent molar's mesial root. In response to such issues, improved irrigation techniques have been created, which use laser pulses to agitate fluids and improve microbial deposit removal. Objective: To assess the effectiveness of the Er,Cr:YSGG laser with a wavelength of 2,780 nm via photon-induced photoacoustic streaming (PIPS) protocol which agitated of 2% chlorohexidine (CHX) in removing mature Enterococcus faecalis (E. faecalis) biofilm in root canal systems of lower molars. Material and Methods: The mesial roots of lower first and second molars were separated and inoculated with E. faecalis bacterial suspension for 30 days. The roots were irrigated with CHX, some of them were agitated with a passive ultrasonic device (PUI), while the other roots were agitated by an Er,Cr:YSGG laser in PIPS at 60 µs/pulse, 5 Hz, (0.25, 0.5, 0.75, and 1) W. An atomic force microscope (AFM) was used as a new method to get the results in the isthmus area; the obtained results from each group were compared with each other. Results: Based on the AFM and SEM analyses, laser and ultrasonic activation groups showed higher antimicrobial efficacy than the conventional syringe irrigation group (P<0.05). Conclusion: Based on the investigation's findings, the activation of 2% CHX solution by Er,Cr:YSGG laser in PIPS and PUI offers better mature bacterial biofilm removal in the mesial root of lower human molars than the same irrigant with the SI technique (AU)

A topografia interna do canal radicular é complexa, especialmente para a raiz mesial do molar permanente. Em resposta a esses problemas, foram criadas técnicas aprimoradas de irrigação, que utilizam pulsos de laser para agitar fluidos e melhorar a remoção de depósitos microbianos. Objetivo: Avaliar a eficácia do laser Er,Cr:YSGG com comprimento de onda de 2.780 nm via protocolo de streaming fotoacústico induzido por fótons (PIPS) que agitou clorohexidina a 2% (CHX) na remoção de Enterococcus faecalis maduro (E. faecalis) biofilme em sistemas de canais radiculares de molares inferiores. Material e Métodos: As raízes mesiais de 28 primeiros e segundos molares inferiores foram separadas e inoculadas com suspensão bacteriana de E. faecalis por 30 dias. As raízes foram irrigadas com CHX, sendo algumas delas agitadas com aparelho ultrassônico passivo (PUI), enquanto as demais raízes foram agitadas com laser Er,Cr:YSGG em PIPS a 60 µs/pulso, 5 Hz (0,25, 0,5, 0,75 e 1) W. Um microscópio de força atômica (AFM) foi utilizado como um novo método para obter os resultados na área do istmo; os resultados obtidos de cada grupo foram comparados entre si. Resultados: Com base nas análises de AFM e SEM, os grupos de ativação por laser e ultrassom apresentaram maior eficácia antimicrobiana do que o grupo de irrigação com seringa convencional (P<0.05). Conclusão: Com base nos achados da investigação, a ativação da solução de CHX a 2% pelo laser Er,Cr:YSGG em PIPS a (60 µs/pulso, 5 Hz, 0,75 W) oferece melhor remoção de biofilme (AU)

Sonication as a tool for disrupting biofilms and recovering microorganisms in bladder catheters / Sonicação como uma ferramenta para romper biofilmes e recuperar microrganismos em cateteres vesicais

Abstract Introduction: Urinary catheter-related infection is commonly associated with bacterial biofilm. The impact of anaerobes is unknown, but their detection in the biofilm on this device has not been previously reported. This study aimed to evaluate the capability to recovery strict, facultative, and aerobic microorganisms in patients using bladder catheters from ICUs using conventional culture, sonication, urinary analysis, and mass spectrometry. Methods: Parallel, sonicated bladder catheters from 29 critically ill patients were compared with their routine urine culture. Identification was performed using matrix-assisted laser desorption/ionization with time-of-flight mass spectrometry. Results: The positivity rate in urine (n = 2, 3.4%) was lower than that in sonicated catheters (n = 7, 13.8%). Conclusion: Bladder catheter sonication showed more positive culture results than urine samples for anaerobic and aerobic microorganisms. The role of anaerobes in urinary tract infection and catheter biofilm is discussed.

Resumo Introdução: A infecção relacionada ao cateter urinário é comumente associada ao biofilme bacteriano. O impacto dos anaeróbios é desconhecido, mas sua detecção no biofilme deste dispositivo não foi relatada anteriormente. Este estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de recuperar microrganismos estritos, facultativos e aeróbios em pacientes que utilizam cateteres vesicais de UTIs utilizando cultura convencional, sonicação, análise urinária e espectrometria de massa. Métodos: Paralelamente, foram comparados cateteres vesicais sonicados de 29 pacientes gravemente enfermos com sua urocultura de rotina. A identificação foi realizada utilizando dessorção/ionização a laser assistida por matriz com espectrometria de massa por tempo de voo. Resultados: A taxa de positividade na urina (n = 2; 3,4%) foi inferior à dos cateteres sonicados (n = 7; 13,8%). Conclusão: A sonicação do cateter vesical apresentou resultados de cultura mais positivos do que as amostras de urina para microrganismos anaeróbios e aeróbios. É discutido o papel dos anaeróbios na infecção do trato urinário e no biofilme do cateter.

Establishment of a saliva donor selection for in vitro biofilm growth / Seleção de doadores de saliva para crescimento de biofilme in vitro

Introdução: O emprego de biofilmes polimicrobianos, utilizando a saliva como inóculo, é um modelo promissor para o estudo de biofilmes cariogênicos in vitro. Entretanto, ainda não existe uma padronização para seleção de doadores de saliva. Objetivo: O objetivo deste estudo foi estabelecer uma metodologia para seleção de doadores de saliva utilizando fatores salivares microbianos e características in vitro do biofilme. Material e método: Para doação de saliva foram selecionados vinte voluntários. Os voluntários permaneceram 24 horas sem escovar os dentes e ficaram em jejum por 2 horas antes da coleta da saliva. Foram avaliados os seguintes parâmetros: viabilidade das bactérias anaeróbias totais e mutans streptococci; concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM) da clorexidina; capacidade de formação de biofilme por meio da biomassa; e a suscetibilidade dos biofilmes à clorexidina. Resultado: A viabilidade bacteriana da saliva, a capacidade de formação de biofilme e a suscetibilidade do biofilme à clorexidina foram apresentadas como média e intervalo de confiança (95%). A diferença entre a viabilidade do biofilme (mutans streptococci e bactérias totais) após tratamento com NaCl 0,9% e diacetato de clorexidina 0,2% foi comparada pelo teste t de Student com nível de significância estabelecido em 5%. A viabilidade total de bactérias anaeróbias (mediana) foi de 7,28 log 1+UFC/mL (unidades formadoras de colônia/mL). A viabilidade dos mutans streptococci na saliva apresentou mediana de 5,47 log 1+UFC/mL. Para capacidade de formação de biofilme a mediana da biomassa foi de 0,1172 A570. Conclusão: O tratamento com clorexidina reduziu significativamente os mutans streptococci e a viabilidade total das bactérias. A metodologia para seleção do doador de saliva foi estabelecida com sucesso.

Introduction: The utilization of polymicrobial biofilms, with saliva as an inoculum, represents a promising model for in vitro studies on cariogenic biofilms. However, there is still no standardization for selecting saliva donors. Objective: The aim of this study is to establish a methodology for the selection of saliva donors using microbial salivary factors and in vitro biofilm characteristics. Material and method: For saliva donation, twenty volunteers were selected. Volunteers remained 24 h without brushing their teeth and fasted for 2 h before saliva collection. The following parameters were evaluated: total anaerobic bacteria and mutans streptococci viability; minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericide concentration (MBC) of chlorhexidine; biofilm forming capacity by biomass assessment; and the susceptibility of biofilms to chlorhexidine. Result: Saliva bacterial viability, biofilm forming capacity and biofilm susceptibility to chlorhexidine were presented as mean and confidence interval (95%). The difference between biofilm (mutans streptococci and Total bacteria) viability after treatment with NaCl 0.9% and 0.2% chlorhexidine diacetate was compared using the Student t-test with a significance level established at 5%. Total anaerobic bacteria viability (median) was 7.28 log 1+CFU/mL (colony forming units/ mL). Mutans streptococci viability in the saliva showed a median of 5.47 log 1+CFU/mL. Biofilm forming capacity showed that biomass had a median of 0.1172 A570. Conclusion: Treatment with chlorhexidine significantly reduced mutans streptococci and total bacteria viability. The methodology for the selection of the saliva donor was successfully established.

Staphylococcus epidermidis productor de biofilm como causa de uretritis en el sexo masculino

Introducción: La emergencia de Staphylococcus epidermidis como patógeno oportunista está relacionada a su capacidad de formación de biofilm. Objetivo: Identificar Staphylococcus epidermidis productor de biofilm como causa de uretritis en el sexo masculino, en el laboratorio de Microbiología del Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología Guantánamo durante el año 2019. Método: Se realizó una investigación observacional, descriptiva y transversal en el laboratorio antes mencionado, con un universo de estudio conformado por 48 pacientes ambulatorios del sexo masculino con diagnóstico clínico de uretritis realizado por al médico de familia y que acudieron al laboratorio de Microbiología de dicho centro con indicación de exudado uretral con cultivo. Las variables estudiadas fueron: producción de las enzimas coagulasa, catalasa y oxidasa, crecimiento en agar manitol salado, sensibilidad de la novobiocina, producción de biofilm y resistencia a los antimicrobianos. Los resultados de las muestras fueron vaciados en una base de datos y fueron procesados con el programa SPSS versión 11.5. Resultados: Se identificó Staphylococcus epidermidis productor de biofilm como causa de uretritis en los 48 pacientes del sexo masculino estudiados. Este microorganismo mostró resistencia nula o disminuida frente a ciprofloxacina, norfloxacina, amikacina, gentamicina, amoxicilina con sulbactam, cotrimoxazol y tetraciclina. Conclusiones: Staphylococcus epidermidis emerge como patógeno oportunista frecuente en pacientes del sexo masculino con diagnóstico clínico de uretritis, con significativa resistencia a los antibióticos betalactámicos no combinados con inhibidores de la betalactamasa.

Introduction: Staphylococcus epidermidis as an opportunistic pathogen and its ability to form biofilm has become an emergency situation. Objective: To identify biofilm-producing Staphylococcus epidermidis as a cause of urethritis in males. Study performed throughout 2019 in the Microbiología Lab of the Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología Lab in Guantánamo. Method: An observational, descriptive and cross-sectional study was carried out at the aforementioned lab, envolving a total of 48 male outpatients with a clinical diagnosis of urethritis certified by the family physician, attended in the Microbiology laboratory with their respective urethral discharge culture indication. The variables studied were as follow: coagulase, catalase and oxidase enzyme production test, growth of mannitol salt agar, novobiocin sensitivity, biofilm production and antimicrobial resistance. The sampling results were introduced in a database and processed with the software SPSS version 11.5. Results: Biofilm-producing Staphylococcus epidermidis was identified as the cause of urethritis in the 48 male patients involved in the study. This microorganism showed cero or low resistance to ciprofloxacin, norfloxacin, amikacin, gentamicin, amoxicillin-sulbactam combination, cotrimoxazole and tetracycline. Conclusions: Staphylococcus epidermidis emerges as a common opportunistic pathogen in male patients with a clinical diagnosis of urethritis, with significant resistance to beta-lactam antibiotics not combined with beta-lactamase inhibitors.

Introdução: O surgimento do Staphylococcus epidermidis como patógeno oportunista está relacionado à sua capacidade de formação de biofilme. Objetivo: Identificar Staphylococcus epidermidis, produtor de biofilme como causador de uretrite em homens, no laboratório de Microbiologia do Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología Guantánamo durante o ano de 2019. Método: Investigação observacional, descritiva e transversal. realizado no referido laboratório, tendo como universo de estudo 48 doentes ambulatórios do sexo masculino com diagnóstico clínico de uretrite feito pelo médico de família e que compareceram ao laboratório de Microbiologia do referido centro com indicação de exsudato uretral com cultura. As variáveis estudadas foram: produção das enzimas coagulase, catalase e oxidase, crescimento em ágar manitol salgado, sensibilidade à novobiocina, produção de biofilme e resistência a antimicrobianos. Os resultados das amostras foram digitados em um banco de dados e processados no programa SPSS versão 11.5. Resultados: O Staphylococcus epidermidis produtor de biofilme foi identificado como a causa da uretrite nos 48 pacientes masculinos estudados. Este microrganismo não apresentou ou apresentou resistência reduzida contra ciprofloxacino, norfloxacino, amicacina, gentamicina, amoxicilina com sulbactam, cotrimoxazol e tetraciclina. Conclusões: Staphylococcus epidermidis surge como um patógeno oportunista frequente em pacientes do sexo masculino com diagnóstico clínico de uretrite, com resistência significativa a antibióticos beta-lactâmicos não combinados com inibidores de beta-lactamase.

Extratos hidroetanólicos de canela (Cinnamomum verum) e romã (Punica granatum L) promovem ação antibacteriana frente cepas resistentes a antibióticos de Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa / Cinnamon (Cinnamomum verum) and pomegranate (Punica granatum L) hydroethanolic extracts promote antibacterial action against antibiotic-resistant strains of Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa

A resistência bacteriana tem aumentado progressivamente no mundo, assim, há necessidade de novas opções de tratamentos. A fitoterapia tem ganhado notoriedade para combater infecções, principalmente as causadas por bactérias resistentes aos antibacterianos disponíveis. Diante do exposto, o presente estudo teve como objetivo preparar e analisar a composição fitoquímica e a ação antibacteriana dos extratos hidroetanólicos de canela (EHC) e romã (EHR) isolados e associados frente culturas planctônicas e biofilmes de cepas padrão e clínicas de Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa, além disso, analisar a ação citotóxica dos extratos em queratinócitos humanos (HaCat). Para isso, os EHC e EHR foram preparados e quantificado o teor de sólidos solúveis. Posteriormente, foi quantificado o teor de flavonoides e fenóis totais, análise antioxidante por meio da redução do radical 2,2'-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH), e a fitoquímica por cromatografia líquida (HPLC). Em relação a ação antibacteriana dos extratos, foi aplicado o teste de microdiluição em caldo (CLSI ­ M7-A9) e a ação sinérgica realizada por meio do ensaio de checkerboard. As concentrações mais efetivas foram analisadas sobre biofilmes em formação (prevenção) e biofilmes formados (tratamento de 24 h), e quantificada a viabilidade por meio do teste colorimétrico MTT. Para avaliar a citotoxidade, os tratamentos foram aplicados sobre cultura celular de HaCat por 24 h e analisados por meio do teste colorimétrico MTT. A análise estatística foi realizada com 5% de significância (p<0.05), analisados pelo método ANOVA complementado pelo Teste de Tukey. Os resultados demonstraram que os EHC e EHR possuem ação antioxidante e presença de fitocompostos. Os extratos apresentaram ação antibacteriana para todas as cepas avaliadas, quando os mesmos foram associados, obteve-se concentrações sinérgicas para as cepas clínicas de A. baumannii. Em relação a ação antibiofilme, o EHC inibiu a formação em 95% e EHR em 96% do biofilme de #Ab 1, enquanto a cepa #Pa 2 teve 92% e 93% de inibição quando em contato com EHC e EHR, respectivamente. Após tratamento de 24 h em biofilmes formados, as reduções da viabilidade foram de 72% para as cepas #Ab 2 e #Ab 3 quando em contato com o EHC, já EHR inibiu em 83% a viabilidade da cepa #Ab ATCC. Para P. aeruginosa (#Pa 2), as reduções da viabilidade foram de 84% e 88,5% quando tratados com EHC e EHR, respectivamente. A avaliação da citotoxicidade em HaCat demonstrou que após tratamentos com diferentes concentrações dos extratos a viabilidade celular se manteve acima de 70% em todos os grupos. Diante disso, conclui-se que os EHC e EHR apresentam importante ação antioxidante e antibacteriana, tanto em culturas planctônicas quanto em biofilmes, e não apresentaram efeitos citotóxicos na faixa de concentração testada. (AU)

Bacterial resistance has progressively increased in the world, thus, there is a need for new treatment options. Phytotherapy has gained notoriety for fighting infections, mainly those caused by bacteria resistant to available antibacterials. In view of the above, the present study aimed to prepare and analyze the phytochemical composition and antimicrobial action of hydroethanolic extracts of cinnamon (EHC) and pomegranate (EHR) isolated and associated against planktonic cultures and biofilms of standard and clinical strains of Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa, in addition, analyze the cytotoxic action of the extracts on human keratinocytes (HaCat). For this, the EHC and EHR were prepared and the soluble solids content was quantified. Subsequently, the content of flavonoids and total phenols, antioxidant analysis through the reduction of the radical 2,2'-diphenyl1-picrylhydrazyl (DPPH), and phytochemistry by liquid chromatography (HPLC) were quantified. Regarding the antimicrobial action of the extracts, the broth microdilution test (CLSI ­ M7-A9) was applied and the synergistic action was performed through the checkerboard test. The most effective concentrations were analyzed on forming biofilms (prevention) and formed biofilms (24 h treatment), and viability was quantified using the MTT colorimetric test. To evaluate the cytotoxicity, the treatments were applied on HaCat cell culture for 24 h and analyzed using the MTT colorimetric test. Statistical analysis was performed with 5% significance (p<0.05), analyzed by the ANOVA method complemented by the Tukey test. The results showed that the EHC and EHR have antioxidant action and presence of phytocompounds. The extracts showed antibacterial action for all evaluated strains, when they were associated, synergistic concentrations were obtained for the clinical strains of A. baumannii. Regarding the antibiofilm action, EHC inhibited formation by 95% and EHR by 96% of the #Ab 1 biofilm, while the #Pa 2 strain had 92% and 93% inhibition when in contact with EHC and EHR, respectively. After 24 h treatment in formed biofilms, viability reductions were 72% for strains #Ab 2 and #Ab 3 when in contact with EHC, whereas EHR inhibited the viability of strain #Ab ATCC by 83%. For P. aeruginosa (#Pa 2), viability reductions were 84% and 88.5% when treated with EHC and EHR, respectively. The evaluation of cytotoxicity in HaCat showed that after treatments with different concentrations of extracts, cell viability remained above 70% in all groups. Therefore, it is concluded that EHC and EHR have important antioxidant and antibacterial action, both in planktonic cultures and in biofilms, and did not show cytotoxic effects in the tested concentration range. (AU)

Uso de plantas medicinais no controle do biofilme dental para o tratamento e prevenção da gengivite -uma revisão / Use of medicinal plants in the control of dental biofilm for the treatment and prevention of gingivitis - a review / Uso de plantas medicinales en el control del biofilm dental para el tratamiento y prevención de la gingivitis - una revisión

Introdução: As gengivites são condições comuns em todas as populações, independente da faixa-etária. A indicação de agentes químicos como antissépticos bucais mostra-se importante prevenindo a formação de novo biofilme na superfície dental. Extratos vegetais têm sido propostos como possibilidades terapêuticas interessantes devido as características antimicrobianas e imunomoduladoras de diversos fitoterápicos. Objetivo: Realizar um levantamento bibliográfico sobre o uso das plantas medicinais no controle do biofilme dental para tratamento e prevenção da gengivite. Metodologia: foi realizada uma análise de dados secundários, através de uma revisão da literatura sobre a utilização de plantas medicinais na prevenção e tratamento da gengivite. Foram analisados artigos científicos publicados entre 2012 a 2021, obtidos nas bases eletrônicas de dados indexados no PubMed, Google Scholar, Lilacs e Scielo, que apresentaram resultados positivos e que tiveram a clorexidina como controle. Resultados: As informações obtidas foram apresentadas em três tabelas separando enxaguatórios e dentifrícios. Nos estudos que comparam colutórios à base de ervas com enxaguatório bucal com clorexidina 0,12%, em sua maioria, discorrem sobre a igualdade da eficácia na redução do biofilme dental e da gengivite. Nos dois trabalhos que avaliaram dentifrícios, pode-se notar que houve uma boa aceitação por parte dos pesquisados e não mostraram efeitos adversos. Conclusão: Os fitoterápicos são bem indicados como alternativas para manter a saúde gengival. Entretanto, devem ser realizados mais ensaios clínicos longitudinais para fundamentar seus efeitos a longo prazo, testando diferentes protocolos, concentrações e parâmetros clínicos de avaliação para esclarecer a relevância clínica destes produtos naturais no controle e tratamento da gengivite.

Introduction: Gingivitis is a common condition in all populations, regardless of age group. The indication of chemical agents such as mouthwashes prove to be important in preventing the formation of a new biofilm on the dental surface. Plant extracts have been proposed as interesting therapeutic possibilities due to the antimicrobial and immunomodulatory characteristics of several herbal medicines. Objective: To carry out a bibliographic survey on the use of medicinal plants in the control of dental biofilm for the treatment and prevention of gingivitis. Methodology: an analysis of secondary data was performed, through a literature review on the use of medicinal plants in the prevention and treatment of gingivitis. Scientific articles published between 2012 and 2021 were analyzed, from electronic databases indexed in PubMed, Google Scholar, Lilacs and Scielo, which presented positive results and which had chlorhexidine as a control. Results: The information was presented in three tables, two of which are separated between mouthwash and toothpaste. The herbal mouthwashes with 0.12% chlorhexidine found that most of them were equally effective in reducing plaque and gingivitis compared to the 0.12% chlorhexidine mouthwash. In the two studies that evaluated toothpastes, it can be noted that there was a good acceptance by those surveyed and they did not show adverse effects. Conclusion: Phytotherapics are well indicated as alternatives to maintain gingival health. However, further longitudinal clinical trials should be performed to substantiate their long-term effects, testing different protocols, concentrations and clinical evaluation parameters to clarify the clinical relevance of these natural products in the control and treatment of gingivitis.

Introducción: La gingivitis es una condición común en todas las poblaciones, independientemente del grupo de edad. La indicación de agentes químicos, como los colutorios, resulta importante para prevenir la formación de un nuevo biofilm en la superficie dental. Los extractos de plantas se han propuesto como interesantes posibilidades terapéuticas debido a las características antimicrobianas e inmunomoduladoras de varias hierbas medicinales. Objetivo: Realizar un estudio bibliográfico sobre el uso de plantas medicinales en el control del biofilm dental para el tratamiento y prevención de la gingivitis. Metodología: se realizó un análisis de datos secundarios, a través de una revisión bibliográfica sobre el uso de plantas medicinales en la prevención y tratamiento de la gingivitis. Se analizaron artículos científicos publicados entre 2012 y 2021, de bases de datos electrónicas indexadas en PubMed, Google Scholar, Lilacs y Scielo, que presentaran resultados positivos y que tuvieran clorhexidina como control. Resultados: La información se presentó en tres tablas, dos de ellas separadas entre colutorio y pasta dentífrica. En los enjuagues bucales a base de plantas con clorhexidina al 0,12% se observó que la mayoría de ellos eran igual de eficaces para reducir la placa y la gingivitis en comparación con el enjuague bucal con clorhexidina al 0,12%. En los dos estudios que evaluaron los dentífricos, puede observarse que hubo una buena aceptación por parte de los encuestados y no mostraron efectos adversos. Conclusiones: Los fitoterápicos están bien indicados como alternativas para mantener la salud gingival. Sin embargo, se deben realizar más ensayos clínicos longitudinales para corroborar sus efectos a largo plazo, probando diferentes protocolos, concentraciones y parámetros de evaluación clínica para aclarar la relevancia clínica de estos productos naturales en el control y tratamiento de la gingivitis.

Streptococcus mutans and Streptococcus dentisani in dental biofilm of children with different caries status: a pilot study / Streptococcus dentisani e Streptococcus mutans no biofilme dental de crianças com diferentes estados de cárie: um estudo piloto

Objective:Streptococcus mutans is one of the etiological agents associated with caries due to its ability to metabolize carbohydrates and resist acidic environments. On the other hand, Streptococcus dentisani, shows characteristics associated with caries control due to its ability to inhibit growth of cariogenic bacteria. The aim of this work was to quantify the levels of Streptococcus mutans and Streptococcus dentisani from dental biofilm of children related to their caries situation. Material and Methods: After identification of morphologic characteristics of reference strains was performed, clinical isolates of biofilm compatible with these strains were selected and the Polymerase Chain Reaction technique was performed using species-specific primers. Biofilm samples from 25 children with caries and 21 without caries were collected to quantify the levels of S. mutans and S. dentisani. Results: There were statistically significant differences in the levels of S. mutans in the caries group and the levels increased as the severity of the carious lesion increased. By contrast, higher levels of S. dentisaniwere found in the caries-free group, although no statistically significant differences were found. In addition, the levels of S. dentisani decreased as the severity of the carious lesion increased. Conclusion: The increase in the frequency of S. dentisani in the caries-free group suggests the possibility of requiring minimum levels of this species in the dental biofilm to show an actual protective effect. It must also be considered that this effect might be related to intrinsic factors in children and the intraspecies genetic variability found in every individual. (AU)

Objetivo : Streptococcus mutans é um dos agentes etiológicos associados à cárie devido à sua habilidade de metabolizar carboidratos e resistir a ambientes ácidos. Já o Streptococcus dentisani , apresenta características associadas ao controle da cárie devido à sua capacidade de inibir o crescimento de bactérias cariogênicas. O objetivo deste trabalho foi quantificar os níveis de Streptococcus mutans e Streptococcus dentisani no biofilme dental de crianças em relação à situação de cárie destas. Material e Métodos: Após a identificação das características morfológicas das cepas de referência, foram selecionados do biofilme isolados clínicos compatíveis com essas cepas e realizada a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase utilizando primers espécie-específicos. Amostras de biofilme de 25 crianças com cárie e 21 sem cárie foram coletadas para quantificar os níveis de S. mutans e S. dentisani. Resultados: Houve diferenças estatisticamente significativas nos níveis de S. mutans no grupo com cárie e os níveis aumentaram à medida que a gravidade da lesão cariosa aumentou. Por outro lado, foram encontrados níveis mais elevados de S. dentisani no grupo sem cáries, embora não tenham sido encontradas diferenças estatisticamente significativas. Além disso, os níveis de S. dentisani diminuíram à medida que a gravidade da lesão cariosa aumentava. Conclusão: O aumento da frequência de S. dentisani no grupo livre de cárie sugere a possibilidade de exigir níveis mínimos desta espécie no biofilme dental para mostrar um efeito protetor real. Deve-se considerar também que esse efeito pode estar relacionado a fatores intrínsecos nas crianças e à variabilidade genética intraespécie encontrada em cada indivíduo. (AU)

In-vitro effect of a single application of CPP-ACP pastes and different fluoridated solutions on the prevention of dental caries around orthodontic brackets

ABSTRACT Objective: To assess the in-vitro effect of single applications of CPP-ACP pastes and different fluoridated solutions on the prevention of dental caries around orthodontic brackets. Material and Methods: Tooth/bracket sets (n=65) were immersed in artificial saliva (1h at 37ºC) and randomly subjected to single applications (100µL; 1min) of casein phosphopeptide-amorphous calcium phosphate (CPP-ACP emulsion), CPP-ACP with fluoride (CPP-ACPF emulsion), solutions of titanium tetrafluoride (TiF4) or sodium fluoride (NaF), or no treatment (CG). Multispecies biofilm (5 x 105 CFU/mL) was formed in the presence of 2% sucrose. After 24 h, the pH and the concentration of total soluble fluoride (TSF) were analyzed by culture medium. The presence of active white spot lesions (WSL) evaluated by macroscopic examination and the percent surface mineral loss (%SML) were analyzed. Also, the topography of enamel was detected by analysis of scanning electron microscopy (SEM). The data was assessed by chi-square, Kruskal-Wallis, and Mann-Whitney tests (p < 0.05). Results: Fluoride-containing compounds led to a smaller pH reduction than did CPP-ACP and CG (p<0.05). There was difference in TSF between the groups (p<0.05), denoted as TiF4> NaF > CPP-ACPF > CPP-ACP > CG. Regarding the presence of WSL and %SML, the NaF group obtained lower values (p<0.05), while TiF4 and CPP-ACPF were similar (p>0.05). SEM demonstrated that fluoride-free groups had a larger surface dissolution. Conclusion: Fluoridated groups including solutions and CPP-ACPF were more effective than CPP-ACP in reducing enamel demineralization around orthodontic brackets after a single application.

RESUMO Objetivo: Avaliar in-vitro o efeito de uma aplicação única de cremes dentais de CPP-ACP e diferentes soluções fluoretadas na prevenção da cárie dentária ao redor de braquetes ortodônticos Material e Métodos: O conjunto dentes/braquetes (n=65) foi imerso em saliva artificial (1h em 37°C) randomizado e submetido a tratamento único (100µL; 1 min) de emulsão de fosfopeptídeo de caseína-fosfato de cálcio amorfo (CPP-ACP) e CPP-ACP associado ao flúor (CPP-ACPF); soluções de tetrafluoreto de titânio (TiF4) e fluoreto de sódio (NaF); e ausência de tratamento (GC). Biofilmes multiespécie (5 x 105 CFU/mL) foram formados na presença de sacarose a 2%. Após 24h, o pH e a concentração de fluoreto solúvel total (FST) foram analisados pelo meio de cultura. Foram avaliadas a presença de lesões de mancha branca (LMB), por meio da análise de macroscopia visual, e a porcentagem de perda de dureza (%PD). Também foi verificada a topografia do esmalte, usando microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os dados foram analisados pelos testes Qui-quadrado, Kruskal-Wallis e Mann-Whitney (p < 0,05). Resultados: Os compostos contendo flúor levaram a uma redução do pH menor do que o CPP-ACP e GC (p<0,05). Houve diferença no FST entre os grupos (p <0,05), sendo TiF4> NaF > CPP-ACPF > CPP-ACP > GC. Quanto à presença de LMB e à %PD, o grupo NaF obteve os menores valores (p<0,05), enquanto TiF4 e CPP-ACPF foram semelhantes (p> 0,05). A MEV demonstrou que os grupos sem flúor tiveram uma dissolução superficial maior. Conclusão: Os grupos fluoretados, incluindo soluções e CPP-ACPF, foram mais eficazes do que o CPP-ACP sem flúor na redução da desmineralização do esmalte ao redor dos braquetes ortodônticos após uma única aplicação.

Ação antimicrobiana de extratos de gengibre (Zingiber officinale) e quilaia (Quillaja saponaria) isolados e associados sobre Pseudomonas aeruginosa resistente a antibióticos / Antimicrobial action of isolated and associated extracts of ginger (Zingiber officinale) and quilaia (Quillaja saponaria) on antibiotic-resistant Pseudomonas aeruginosa

Extratos de plantas têm demonstrado diversos efeitos positivos para a saúde, incluindo ação antimicrobiana, no entanto, o uso clínico da fitoterapia ainda é discreto, de modo que mais estudos sobre os efeitos benéficos do sinergismo farmacológico de extratos poderiam contribuir para sua aplicação terapêutica. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dos extratos glicólicos de gengibre (EG) e quilaia (EQ) isolados e em associação sobre 7 cepas clínicas de Pseudomonas aeruginosa e uma cepa padrão em forma planctônica e biofilmes monotípicos. Para a análise antimicrobiana sobre cultura planctônica foram feitos testes para determinação de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Microbicida Mínima (CMM) (CLSI, M07-A9) dos extratos isolados, além do Índice de Concentração Inibitória Fracionada (ICIF) e do Índice de Concentração Microbicida Fracionada (ICMF) para os extratos combinados. A análise estatística foi feita com método ANOVA e teste de Tukey para dados com distribuição normal e Kruskall-Wallis com Teste de Comparação Múltipla de Dunn para dados sem distribuição normal (significância de 5%). Para cepa padrão foram determinadas CIM igual a 3,12 mg/mL e CMM igual a 6,25 mg/mL para ambos os extratos. Para cepas clínicas as CIM do EG foram 3,12 ou 6,25 mg/mL e de EQ 1,56 ou 3,12 mg/mL, enquanto os valores de CMM foram de 6,25 mg/mL para EG e de 1,56, 3,12 ou 6,25 mg/mL para EQ. Os resultados de ICIF indicaram 15 associações sinérgicas e 4 associações aditivas dos extratos contra a cepa padrão e, dentre cepas clínicas, foram obtidos 15 resultados aditivos. A partir dos resultados de ICMF foram identificadas 6 associações sinérgicas e 1 associação aditiva contra a cepa padrão, além de 8 associações com efeito aditivo contra cepas clínicas. A partir dos resultados de testes em culturas planctônicas foi avaliada a ação antibiofilme sobre as cepas em que foram observadas reduções de viabilidade de 36,7 e 34% para o EG (50 e 25 mg/mL) e 51,3 e 51,4% para EQ (25 e 12,5 mg/mL) contra cepa padrão. As reduções em cepas clínicas variaram de 43 a 73% com EG e de 36 a 79% para EQ. As associações dos extratos promoveram reduções de viabilidade de 8 a 35% contra 5 das 7 cepas clínicas. Conclui-se que os extratos glicólicos de gengibre e quilaia apresentam ação antimicrobiana de forma isolada e combinados com efeito aditivo sobre a forma planctônica de cepas clínicas resistentes de P. aeruginosa. De forma isolada, os extratos apresentaram importante ação preventiva na formação dos biofilmes dessas cepas, podendo ser considerados potenciais fitoterápicos com aplicações terapêuticas para o combate das infecções por P. aeruginosa. (AU)

Plant extracts have demonstrated several positive health effects, including antimicrobial action, however, the clinical use of phytotherapy is still discreet, so that more studies on the beneficial effects of pharmacological synergism of extracts could contribute to its therapeutic application. The aim of this study was to evaluate the effects of glycolic extracts of ginger (EG) and quilaia (EQ) alone and in combination on 7 clinical strains of Pseudomonas aeruginosa and a standard strain in planktonic form and monotypic biofilms. For the antimicrobial analysis on planktonic culture, tests were performed to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Microbicidal Concentration (MMC) (CLSI, M07-A9) of the isolated extracts, in addition to the Fractional Inhibitory Concentration Index (FICI) and the Fractionated Microbicidal Concentration Index (FICM) for the combined extracts. Statistical analysis was performed using the ANOVA method and Tukey's test for data with normal distribution and Kruskall-Wallis with Dunn's Multiple Comparison Test for data without normal distribution (5% significance). For the standard strain, MIC were determined equal to 3.12 mg/mL and MMC equal to 6.25 mg/mL for both extracts. For clinical strains the MIC of EG were 3.12 or 6.25 mg/mL and 1.56 or 3.12 mg/mL of EQ, while the MMC values were 6.25 mg/mL for EG and 1.56, 3.12 or 6.25 mg/ml for EQ. The FICI results indicated 15 synergistic and 4 additive associations of the extracts against the standard strain and, among clinical strains, 15 additive results were obtained. From the FICM results, 6 synergistic and 1 additive association against the standard strain were identified, in addition to 8 associations with additive effect against clinical strains. Based on the results of tests on planktonic cultures, the antibiofilm action were evaluated on the strains in which viability reductions of 36 and 34% were observed for EG (50 and 25 mg/mL) and 51% were observed for EQ (25 and 12, 5 mg/mL) against the standard strain. Reductions in clinical strains ranged from 43 to 73% with EG and from 36 to 79% for EQ. Associations of extracts promoted viability reductions of 8 to 35% against 5 out of 7 clinical strains. It is concluded that the glycolic extracts of ginger and quilaia have antimicrobial action in isolation and combined with additive effect on the planktonic form of resistant clinical strains of P. aeruginosa. Isolated, the extracts showed an important preventive action in the formation of biofilms of these strains and may be considered potential herbal medicines with therapeutic applications to combat P. aeruginosa infections. (AU)

Antimicrobial efficacy of S-PRG containing toothpastes on S. mutans biofilm development / Eficácia antimicrobiana de dentifrícios contendo S-PRG sobre o desenvolvimento de biofilme de S. mutans

Objective: to investigate the antimicrobial effects of toothpastes containing bioactive surface pre-reacted glass particles (S-PRG) on S. mutans biofilms adherence, initial colonization and maturation. Material and Methods: a reference UA 159 and a clinical S. mutans (SM6) strain were used. Bovine enamel specimens were randomly allocated into the groups (n=5): toothpastes containing 0%; 1%; 5%; 20%; 30% S-PRG; positive control dentifrice (NaF+triclosan); and negative control (distilled water). For biofilm development, samples were placed in a 24-well plate containing artificial saliva (4h), followed by adding 1mL of artificial saliva, BHI broth and 225µL of S. mutans suspension. Treatments with toothpastes were applied previously or after 4h and 24h of biofilm formation. Samples were incubated for 48h at 37°C in 5%CO2 and biofilm was detached and seeded in Petri dishes for determining the number of viable cells. Data were analyzed by ANOVA and Tukey test (5%). Results: significantly lower microorganisms' adherence (p<0.05) was obtained for all S-PRG toothpastes, with similar results to NaF+triclosan for SM6 and 20 and 30%S-PRG groups exhibiting higher inhibition effect than the NaF+Triclosan for UA159. Antibacterial effect on the early-stage biofilm was also observed for the S-PRG groups, but was not superior to the NaF+Triclosan toothpaste. For the mature biofilm, the effective antimicrobial potential of S-PRG toothpastes was observed only for the SM6 clinical strain, but was not higher than the positive control. Conclusion: experimental S-PRG toothpastes were effective to inhibit S. mutans biofilm growth by exhibiting antimicrobial activity, being promising agents to prevent cariogenic biofilm development (AU)

Objetivo: investigar o efeito de dentifrícios contendo S-PRG sobre a colonização inicial e maturação de biofilmes de S. mutans. Material e Métodos: uma cepa de referência (UA 159) e uma cepa clínica de S. mutans (SM6) foram utilizadas. Espécimes de esmalte bovino foram alocados nos grupos (n=5): dentifrícios contendo 0%; 1%; 5%; 20% e 30%S-PRG; controle positivo (NaF+triclosan); e controle negativo (água destilada). Os espécimes foram inseridos em uma placa de 24 poços contendo saliva artificial (4h), seguido por adição de 1mL de saliva artificial, BHI, 225µL de suspensão de S. mutans e foram tratados com suspensões de dentifrícios antes ou depois de 4 e 24h da formação do biofilme. Os espécimes foram incubados por 48h e o biofilme foi removido dos espécimes e semeado em placas de Petri para contagem de UFC/mL. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (5%). Resultados: houve diminuição na adesão de microrganismos para os grupos tratados com S-PRG (p<0.05). Para SM6, os dentifrícios contendo S-PRG apresentaram resultados semelhantes ao NaF+triclosan e para a cepa UA159 o dentifrício com 30%S-PRG apresentou efeito superior. Efeito antimicrobiano no biofilme recém-formado (4h) foi observado para os grupos contendo S-PRG, mas não foi observado efeito superior ao NaF+Triclosan. Para o biofilme maduro, efeito antimicrobiano do S-PRG foi observado apenas para a cepa clínica, mas não superior ao efeito do NaF+Triclosan. Conclusão: dentifrícios contendo S-PRG foram eficazes na inibição do desenvolvimento de biofilmes de S. mutans, sendo promissores agentes para prevenir o desenvolvimento de biofilme cariogênico. (AU)

Asociación entre obesidad y caries dental en niños y adolescentes. Revisión

Obesidad y caries dental comparten factores de riesgo comunes y modificables: dieta y estilo de vida. Objetivo: Identificar y analizar la literatura disponible sobre la posible asociación entre obesidad y caries dental en niños y adolescentes. Método: Dos investigadoras realizaron una revisión de la literatura en idiomas español, inglés y portugués utilizando Pubmed, SciELO, Latindex y Cochrane (obesidad AND índice de masa corporal AND caries AND niños OR adolescentes). Resultados: Se identificaron 115 artículos y fueron incluidos 28 luego del análisis a texto completo (21 estudios transversales, 4 longitudinales, 3 revisiones sistemáticas). Cuatro estudios transversales y uno longitudinal mostraron asociación entre obesidad y presencia de caries. Conclusiones: Los estudios analizados sobre asociación entre obesidad y caries presentan resultados inconsistentes. El origen multifactorial de las patologías analizadas puede contribuir a rechazar la hipótesis de asociación de ambas patologías a partir del consumo excesivo de carbohidratos y azúcares fermentables.

A obesidade e a cárie dentária compartilham fatores de risco comuns e modificáveis: dieta e estilo de vida. Objetivo: Identificar e analisar a literatura disponível sobre a possível associação entre obesidade e cárie dentária em crianças e adolescentes. Método: Dois pesquisadoras realizaram uma revisão da literatura em espanhol, inglês e português usando Pubmed, SciELO, Latindex e Cochrane (obesidade E índice de massa corporal E cárie E crianças ou adolescentes). Resultados: 115 artigos foram identificados e 28 foram incluídos após análise do texto completo (21 estudos transversais, 4 estudos longitudinais, 3 revisões sistemáticas). Quatro estudos transversais e um longitudinal demonstraram a associação entre obesidade e presença de cárie. Conclusões: Os estudos analisados ​​sobre a associação entre obesidade e cárie apresentam resultados inconsistentes. A origem multifatorial das patologias analisadas pode contribuir para rejeitar a hipótese de associação entre elas a partir do consumo excessivo de carboidratos e açúcares fermentescíveis.

Avaliação dos efeitos antifúngicos de fármacos inibidores seletivos da recaptação de serotonina em Cryptococcus gattii / Evaluation of the antifungal effects of selective serotonin reuptake inhibitors in Cryptococcus gattii

A criptococose é uma infecção fúngica que acomete tanto indivíduos imunocomprometidos como imunocompetentes. O arsenal antifúngico é limitado, existem relatos de desenvolvimento de resistência fúngica a esses compostos e também alta toxicidade ao paciente. O reposicionamento de fármacos dos inibidores seletivos da recaptação de serotonina (ISRS) tem mostrado ação contra espécies fúngicas, tornando estes compostos alternativas a serem estudadas para o tratamento das infecções criptocócicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos antifúngicos em cápsula, biofilme e células planctônicas de Cryptococcus gattii (cepa ATCC 56990 e isolado clínico 5) dos fármacos ISRS, cloridrato de fluoxetina (CF) e cloridrato de paroxetina (CP). Para isso, foi utilizada a técnica de microdiluição em caldo de acordo com European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM), sendo a CIM de 31,25 µg/mL determinada para os fármacos CF e CP e ambos os fármacos demonstraram ação fungicida (CIM/CFM = 1). Em seguida foi verificado atividade sinérgica dos fármacos CF e CP combinados com anfotericina B (AmB), como resultado encontramos três concentrações sinérgicas, para CF reduzindo 8 e 4x em relação ao valor de CIM, para CP reduzindo 4x em relação ao valor de CIM e para AmB houve redução de 4x em relação ao valor de CIM. Posteriormente, o efeito dos fármacos mencionados foi avaliado na redução da biomassa do biofilme, por meio da técnica de cristal violeta. Nas concentrações 10x (312,5 µg/mL) e 20x (625 µg/mL) CIM de observou-se a redução da biomassa do biofilme de C. gattii em 57,72% a 76,66% para CF e redução entre 42,69 a 68,03% para CP. Além disso, em concentrações sub- inibitórias, ambos fármacos reduziram o tamanho da cápsula da levedura em até 62,46% para CF e 58,94% para CP. Também foi analisada a viabilidade do biofilme pela contagem de unidades formadoras de colônia/mL, após tratamento com CF e CP 20x valor de CIM e foi observada redução entre 1,21 a 1,446 log na viabilidade do biofilme (p< 0,0001). Ainda, o efeito dos fármacos em biofilme foi avaliado quanto ao efeito na atividade metabólica pelo ensaio XTT nas concentrações 10x e 20x CIM de ambos os fármacos foi possível observar redução entre 39,05% a 84,62% para CF e redução entre 56,99% a 67,64% para CP. Assim, os fármacos avaliados apresentaram potencial antifúngico frente C. gattii em todos os ensaios in vitro, podendo ser considerados novas alternativas para o tratamento deste patógeno (AU)

Cryptococcosis is a fungal infection that affects both immunocompromised and immunocompetent individuals. The antifungal arsenal is limited, there are reports of the development of fungal resistance to these compounds and also high toxicity to the patient. The drug repositioning of selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) has shown action against fungal species, making these compounds alternatives to be studied for the treatment of cryptococcal infections. Thus, the aim of this study was to evaluate the antifungal effects on capsule, biofilm and planktonic cells of Cryptococcus gattii (ATCC strain 56990 and clinical isolate 5) of the SSRI drugs, fluoxetine hydrochloride (FLH) and paroxetine hydrochloride (PAH). For this, the broth microdilution technique was used according to European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and the MIC of 31.25 µg/mL was determined for the drugs (FLH) and PAH and both drugs demonstrated fungicidal action (MIC/CFM = 1).Then it was verified synergistic activity of the drugs FLH and PAH combined with amphotericin B (AmB), as a result we found three synergistic concentrations, for FLH reducing 8 and 4x compared to the MIC value, for PAH reducing 4x compared to the MIC value and for AmB there was 4x reduction compared to the MIC value. Subsequently, the effect of the mentioned drugs was evaluated in the reduction of biofilm biomass by means of the crystal violet technique. At 10x (312.5 µg/mL) and 20x (625 µg/mL) MIC concentrations of it was observed the reduction of C. gattii biofilm biomass by 57.72% to 76.66% for FLH and reduction between 42.69 to 68.03% for PAH. Furthermore, at sub-inhibitory concentrations, both drugs reduced the yeast capsule size by up to 62.46% for FLH and 58.94% for PAH. The biofilm viability was also analyzed by counting colony forming units/mL, after treatment with FC and CP 20x the MIC value and a reduction between 1.21 to 1.446 log in biofilm viability was observed (p< 0.0001). Also, the effect of the drugs in biofilm was evaluated as the effect on the metabolic activity by the XTT assay in concentrations 10x and 20x MIC of both drugs was possible to observe reduction between 39.05% to 84.62% for FC and reduction between 56.99% to 67.64% for CP. Thus, the drugs evaluated showed antifungal potential against C. gattii in all in vitro assays, and may be considered new alternatives for the treatment of this pathogen.(AU)

Reposicionamento de fármacos para cryptococose: avaliação experimental do cloridrato de duloxetina em Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii / Repositioning of drugs for cryptococcosis: experimental evaluation of duloxetine hydrochloride in Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gatti

Infecções fúngicas como as causadas por Cryptococcus spp. são de alta mortalidade e morbidade. O reposicionamento de fármaco, ou seja, a utilização de compostos para finalidade diferente da qual esse foi desenvolvido, pode ser uma alternativa para identificar fármacos mais eficazes. Assim, este estudo tem como propósito avaliar a atividade antifúngica, in vitro e in vivo, do fármaco cloridrato de duloxetina (CD), antidepressivo pertencente a classe dos Inibidores Seletivos da Recaptação da Serotonina e Norepinefrina frente a cepas padrões e clínicas de Cryptococcus neoformans e C. gattii. Foi utilizada a técnica de microdiluição de acordo com o European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) para determinar a Concentração Inibitória Mínima (MIC), e a técnica do "tabuleiro de xadrez" para avaliar o efeito sinérgico de anfotericina B (AmB) em associação com CD. Além disso, foi avaliado o efeito de CD na quantidade do ergosterol. O efeito do CD também foi avaliado em biofilmes de C. neoformans e C. gattii, analisando a biomassa por cristal violeta, a viabilidade celular por XTT e morfologia através das imagens de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). In vivo, a eficácia de CD foi avaliada por curvas de sobrevivência no modelo invertebrado Galleria mellonella. CD foi ativo frente a todas as cepas clínicas e padrões de C. neoformans e C. gattii, apresentando valores de CIM e CFM na faixa de 15,62 ­ 62,5 µg/mL. A combinação de CD com AmB apresentou uma combinação sinérgica, reduzindo o valor da CIM em 4 vezes tanto para CD quanto para AmB. CD não produziu redução na quantidade de ergosterol presente na membrana de C. gattii ATCC e C. neoformans ATCC. Em biofilmes, foi observada a redução da biomassa do biofilme em até 82,16% e redução de 99,6% na viabilidade celular de C. gattii. Em biofilmes de C. neoformans a redução foi de 81,13% e 99,5% respectivamente para a análise de biomassa e viabilidade. As imagens de MEV corroboraram com os achados dos ensaios realizados para análise do efeito de CD em biofilmes. Em G. mellonella aumentou a sobrevivência da larva quando utilizado na concentração de 3,125 mg/larva. Assim, os ensaios validaram a hipótese de que o cloridrato de duloxetina tem ação antifúngica e antibiofilme in vitro frente a cepas clínicas e cepas padrões de C. neoformans e C. gattii. (AU)

Fungal infections such as those caused by Cryptococcus spp. are of high mortality and morbidity. Drug repositioning, that is, the use of compounds for a purpose different from the one for which it was developed, can be an alternative to identify more effective drugs. Thus, this study aims to evaluate the antifungal activity, in vitro and in vivo, of the drug duloxetine hydrochloride (CD), an antidepressant belonging to the class of Selective Serotonin and Norepinephrine Reuptake Inhibitors against standard and clinical strains of Cryptococcus neoformans and C. gattii. The microdilution technique according to the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) was used to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and the "chessboard" technique was used to evaluate the synergistic effect of amphotericin B (AmB) on association with CD. In addition, the effect of CD on the amount of ergosterol was evaluated. The effect of CD was also evaluated in C. neoformans and C. gattii biofilms, analyzing the biomass by crystal violet, cell viability by XTT and morphology through Scanning Electron Microscopy (SEM) images. In vivo, the effectiveness of CD was evaluated by survival curves in the Galleria mellonella invertebrate model. CD was active against all clinical strains and patterns of C. neoformans and C. gattii, with MIC and CFM values in the range of 15.62 ­ 62.5 µg/mL. The combination of CD with AmB showed a synergistic combination, reducing the MIC value by 4 times for both CD and AmB. CD did not produce a reduction in the amount of ergosterol present in the membrane of C. gattii ATCC and C. neoformans ATCC. In biofilms, a reduction in biofilm biomass of up to 82.16% and a 99.6% reduction in cell viability of C. gattii were observed. In C. neoformans biofilms the reduction was 81.13% and 99.5% respectively for biomass and viability analysis. The SEM images corroborated the findings of the tests carried out to analyze the effect of CD on biofilms. In G. mellonella, larval survival increased when used at a concentration of 3.125 mg/larvae. Thus, the tests validated the hypothesis that duloxetine hydrochloride has antifungal and antibiofilm action in vitro against clinical strains and standard strains of C. neoformans and C. gattii.(AU)

Efeito antimicrobiano e propriedades mecânicas da zircônia translúcida revestida por vidros experimentais / Antimicrobial effect and mechanical properties of translucent zirconia coated with experimental glasses

Objetivos: Avaliar as propriedades mecânicas, atividade antimicrobiana e citocompatibilidade da zircônia translúcida 5Y-PSZ revestida por vidros experimentais contendo boro e prata. Métodos: Discos 5Y-PSZ (KATANA UTML™, Kuraray Noritake) foram processados e divididos em quatro grupos: polido, sem nenhum revestimento (Controle), aplicação de glaze comercial (Glaze) e vidros experimentais contendo prata (AgCoat) e boro (BCoat). As amostras foram submetidas aos testes de dureza Vickers, testes de flexão biaxial, análise fractográfica e rugosidade através de perfilometria óptica. O potencial antimicrobiano foi caracterizado usando biofilmes de espécie única de Streptococcus mutans e Candida albicans. Foi realizada a quantificação de unidades viáveis formadoras de colônias (UFC), atividade metabólica (CV), ensaios de matriz polissacarídica extracelular (EPS) e biovolume. Biofilmes foram visualizados por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e microscopia confocal de varredura a laser (CLSM). A citocompatibilidade foi determinada usando os testes WST-1 e LIVE&DEAD usando células-tronco do ligamento periodontal (PDLSCs) por 24 h. Todas as caracterizações biológicas foram realizadas em triplicatas técnicas e biológicas usando amostras independentes. As análises estatísticas foram realizadas por ANOVA de uma via, teste de Tukey, análise de Weibull e análise de correlação de Pearson. Resultados: BCoat, AgCoat e Glaze alcançaram dureza semelhante, que foi menor que o Controle. BCoat teve a maior resistência à flexão e parâmetros de Weibull (m = 11,5, sF 625 MPa, s0 620) seguido por AgCoat (m = 5,3; sF 464 MPa, s0 478 MPa). BCoat diminuiu significativamente a formação de biofilmes, conforme mostrado pela menor UFC (5,94 log-UFC/mm2) e atividade metabólica (0,17 a.u.) em comparação com os outros grupos (AgCoat: 6,44 log-UFC/mm2, 0,89 a.u.; Glaze: 6,81 log UFC/mm2, 1,21 a.u.; Controle: 6,82 logUFC/mm2, 1,25 a.u.). BCoat e AgCoat apresentaram os menores valores de EPS (0,11 a.u.), seguidos por Glaze e Controle (0,13 a.u.; 0,14 a.u., respectivamente). MEV e CLSM revelaram que os biofilmes no BCoat eram finos, esparsos, com menor biovolume, enquanto os outros grupos produziram biofilmes robustos com maior biovolume. Os ensaios de viabilidade celular não mostraram toxicidade para PDLSCs para todos os grupos. Conclusão: 5Y-PSZ revestida por vidro experimental contendo boro surge como uma estratégia potencial para melhorar as propriedades mecânicas e antimicrobianas do material (AU).

Objectives: To evaluate the mechanical and antimicrobial properties of boroncontaining coating on translucent zirconia (5Y-PSZ). Methods: 5Y-PSZ discs (Control) were coated with a glaze (Glaze), silver- (AgCoat), or boron-containing (BCoat) glasses. The coatings' antimicrobial potential was characterized using S. mutans and C. albicans biofilms through viable colony-forming units (CFU), metabolic activity (CV), and the extracellular polysaccharide matrix (EPS). Biofilm architectures were imaged under scanning electron and confocal laser scanning microscopies (SEM and CLSM). Cytocompatibility was determined at 24 h via WST-1 and LIVE&DEAD assays using periodontal ligament stem cells (PDLSCs). The coatings' effects on mechanical properties were characterized by Vickers hardness, biaxial bending tests, and fractography analysis. Statistical analyses were performed via one-way ANOVA, Tukey's tests, Weibull analysis, and Pearson's correlation analysis. Results: BCoat significantly decreased biofilm formation, having the lowest CFU and metabolic activity compared with the other groups. BCoat and AgCoat presented the lowest EPS, followed by Glaze and Control. SEM and CLSM images revealed that the biofilms on BCoat were thin and sparse, with lower biovolume. In contrast, the other groups all yielded similarly robust biofilms with higher biovolume without compromising PDLSC viability. BCoat, AgCoat, and Glaze also presented similar hardness significantly lower than Control. BCoat had the highest flexural strength, characteristic strength and Weibull parameters (sF : 625 MPa; s0: 620 MPa; m = 11.5), followed by AgCoat (sF : 464 MPa; s0: 478 MPa; m = 5.3). Significance: BCoat is a cytocompatible glass with promising antimicrobial properties that can improve the mechanisms and reliability of 5Y-PSZ (AU).

Gingival state and presence of red complex bacteria in 12-Year-Old schoolchildren / Estado gingival y presencia de bacterias del complejo rojo en escolares de 12 años

Abstract The objective of this study was to determine the gingival state and presence of red complex bacteria in saliva samples of 12-year-old schoolchildren. A calibrated periodontist evaluated biofilm index (BI) (Silness and Löe, 1964), presence of calculus, and gingival index (GI) (Silness and Löe, 1967) in sixty two 12-year-old students of Carmen Lyra School. Saliva samples were collected from each student. The DNA of each sample was extracted and amplified by the polymerase chain reaction (PCR) technique, using specific primers. The BI was 1.18. Calculus was present in 40.40% of the schoolchildren examined; 19.4% was supragingival calculus and 21% both supragingival and subgingival calculus. The GI was 0.97, which according to Silness and Löe is mild gingivitis. Gingivitis was present in 96.8% of the children examined. Regarding the PCR tests: 18 of the samples (31.58%) did not present any of the bacteria analyzed and the remaining 39 samples (68.42%) were positive for at least the presence of red complex bacteria. Within the limitations of this study, it is concluded that the prevalence of gingivitis and calculus is high in the sample examined, and the gingival state observed in the study population, may be related to the presence of red complex bacteria.

Resumen El objetivo de este estudio era determinar el estado gingival y la presencia de bacterias del complejo rojo en muestras de saliva de niños de 12 años de la Escuela Carmen Lyra. Una periodoncista calibrada evaluó en 62 estudiantes de 12 años de la Escuela Carmen Lyra, el índice de biofilme (IB) (Silness y Löe, 1964), la presencia de cálculo y el índice gingival (IG) (Silness y Löe, 1967). Se recolectaron muestras de saliva de cada estudiante. El ADN de cada muestra fue extraído y amplificado por medio de la prueba PCR, empleando primers específicos, para determinar la presencia de bacterias del complejo rojo. El IB fue de 1.18. El cálculo estuvo presente en el 40.40% de la muestra, se encontró 19.4% de cálculo en supragingival y 21% tanto en supragingival como en subgingival. El IG fue de 0.97, que de acuerdo con Silness y Löe es una gingivitis leve. La gingivitis estuvo presente en el 96.8 % de los niños examinados. Con respecto a las pruebas PCR: 18 de las muestras (31.58 %) no presentaron ninguna de las bacterias analizadas y las 39 muestras restantes (68.42%) fueron positivas por lo menos a la presencia de las bacterias del complejo rojo. Dentro de las limitaciones de este estudio, se concluye que la prevalencia de gingivitis y cálculo es alta en la muestra examinada y el estado gingival observado puede estar relacionado con la presencia de bacterias del complejo rojo.

Infecção do trato urinário por leveduras do gênero Candida ­ revisão de literatura / Urinary tract infection by yeast of the genus Candida - literature review / Infección del tracto urinario causada por levaduras del género Candida - revisión de la literatura

A ocorrência das infecções do trato urinário (ITU) causadas por leveduras do gênero Candida estão aumentando consideravelmente nas últimas décadas, sendo a Candida albicans a mais comumente diagnosticada como causadora deste tipo de infecções. Contudo, outras espécies, como exemplo da Candida tropicalis, estão emergindo como preocupantes causadores da doença. Neste sentido, o objetivo do presente trabalho é revisar os aspectos relacionados com as ITU causadas por leveduras do gênero Candida. Foi realizada uma pesquisa na base de dados PubMed, buscando artigos sobre a epidemiologia, patogenia e tratamento das ITU causadas por leveduras do gênero Candida. As espécies de Candida são os fungos patogênicos oportunistas mais relevantes causadores de infecções nosocomiais e podem causar infecção no trato urinário, tanto inferior (ureteres, bexiga e uretra) quanto superior (rins), principalmente em pacientes imunocomprometidos. Existem alguns fatores predisponentes, como gênero feminino, idade avançada, diabetes mellitus, hospitalização prolongada, imunossupressão, gravidez, hipertensão, neutropenia, cálculos renais, infecções nosocomiais, terapia antibiótica e procedimentos, como a cateterização, que atuam como facilitadores das ITU por Candida spp. A doença pode ocorrer de forma assintomática, porém, pode evoluir para casos mais graves com comprometimento sistêmico em situações de candidemia que pode causar a morte do paciente, principalmente se tratando de indivíduos imunocomprometidos. Sendo assim, devido ao risco existente, a doença não pode ser negligenciada e um diagnóstico preciso e um tratamento adequado devem ser estabelecidos.

The occurrence of urinary tract infections (UTI) caused by yeasts of the genus Candida has increased considerably in recent decades, with Candida albicans being the most commonly diagnosed as causing this type of infections. However, other species, such as Candida tropicalis, are emerging as worrisome causes of the disease. In this sense, the objective of the present paper is to review the aspects related to the UTI caused by yeasts of the genus Candida. A search was carried out in the PubMed database, searching for articles on the epidemiology, pathogenesis and treatment of UTI caused by yeasts of the genus Candida. Candida species are the most relevant opportunistic pathogenic fungi that cause nosocomial infections and can cause both lower (ureters, bladder and urethra) and upper (kidneys) urinary tract infections, especially in immunocompromised patients. There are some predisposing factors, such as female gender, advanced age, diabetes mellitus, prolonged hospitalization, immunosuppression, pregnancy, hypertension, neutropenia, kidney stones, nosocomial infections, antibiotic therapy and procedures, such as catheterization, that act as facilitators of UTI by Candida spp. The disease can occur asymptomatically, however, it can progress to more severe cases with systemic involvement in situations of candidemia that can cause the death of the patient, especially in immunocompromised individuals. Therefore, due to the existing risk, the disease cannot be neglected and an accurate diagnosis and adequate treatment must be established.

La aparición de infecciones del tracto urinario (ITU) causadas por levaduras del género Candida ha aumentado considerablemente en las últimas décadas. Candida albicans es la infección por levaduras más comúnmente diagnosticada. Sin embargo, otras especies, como la Candida tropicalis, están surgiendo como causa preocupante de la enfermedad. En este sentido, el objetivo del presente trabajo es revisar los aspectos relacionados con la ITU causada por levaduras del género Candida. Se realizó una búsqueda en la base de datos PubMed, buscando artículos sobre la epidemiología, la patogénesis y el tratamiento de la ITU causada por levaduras del género Candida. Las especies de Candida son los hongos patógenos oportunistas más relevantes que causan infecciones nosocomiales y pueden provocar infecciones del tracto urinario inferior (uréteres, vejiga y uretra) y superior (riñones), especialmente en pacientes inmunodeprimidos. Existen algunos factores predisponentes, como el sexo femenino, la edad avanzada, la diabetes mellitus, la hospitalización prolongada, la inmunosupresión, el embarazo, la hipertensión, la neutropenia, los cálculos renales, las infecciones nosocomiales, la terapia con antibióticos y los procedimientos como el cateterismo, que actúan como facilitadores de la ITU por Candida spp. La enfermedad puede presentarse de forma asintomática, pero puede evolucionar a casos más graves con afectación sistémica en situaciones de candidemia que pueden causar la muerte del paciente, especialmente en individuos inmunodeprimidos. Por lo tanto, debido al riesgo existente, no se puede descuidar la enfermedad y se debe establecer un diagnóstico preciso y un tratamiento adecuado.

Capacidade de formação de biofilmes e perfil de resistência de Acinetobacter baumannii isolados em unidades de terapia intensiva: uma revisão sistemática

Introdução: Acinetobacter baumanni é um cocobacilo Gram negativo responsável por elevadas taxas de infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS). Apresenta alto nível de resistência intrínseca a antimicrobianos, além da capacidade de adquirir resistência a carbapenêmicos e polimixinas. Ainda, A. baumannii possui habilidade para produzir biofilmes em superfícies abióticas e bióticas, o que favorece a infecção de pacientes gravemente enfermos internados em unidades de terapia intensiva (UTI). Deve ser ressaltado que bactérias envolvidas em biofilmes apresentam maior resistência aos antimicrobianos, atribuída a fatores bioqúmicos, moleculares e as condições dos hospedeiros, o que dificulta o tratamento dessas infecções. Objetivos: Avaliar a produção de biofilme por isolados de A. baumannii recuperados de pacientes internados em UTIs, bem como operfil de susceptibilidade a antimicrobianos (aminoglicosídeos, tigeciclina, carbapenêmicos e polimixinas) entre esses isolados. Métodos: Foi realizada uma revisão sistemática de acordo com os critérios Prisma nos bancos de dados Pubmed/Medline, Scopus, Lilacs, Scielo, e Web of Science. Resultados: Foram incluídos um total de 12 artigos que avaliaram 1006 isolados clínicos de A. baumannii, os quais todos foram resistentes aos carbapenê-micos. No entanto, a maioria dos isolados permaneceu sensível as polimixinas B e E(94,46%). A porcentagem dos isolados produtores de biofilme foi alta (96,3%), e neste estudo não fica clara a relação entre a habilidade de produzir biofilmes e a resistência aos antimicrobianos analisados. Conclusão: Mais estudos devem ser conduzidos para monitorar a resistência aos antimicrobianos em A. baumannii, sobretudo em produtores de biofilme, visto que o manejo terapêutico das infecções ocasionadas por essas linhagens torna-se mais complexo e desafiador.

SUMMARY Introduction: Acinetobacter baumanni is a Gram-negative coccobacillus responsible for high rates of healthcare-related infections (HAI). It has a high level of intrinsic resistance to antimicrobials, in addition to the ability to acquire resistance to carbapenems and polymyxins. Furthermore, A. baumannii has the ability to produce biofilms on abiotic and biotic surfaces, which favors the infection of critically ill patients admitted to intensive care units (ICU). It should be noted that bacteria involved in biofilms have greater resistance to antimicrobials, attributed to biochemical and molecular factors and the conditions of the hosts, which makes the treatment of these infections difficult. Objectives: To evaluate the biofilm production by A. baumannii isolates recovered from ICU patients, as well as the antimicrobial susceptibility profile (aminoglycosides, tigecycline, carbapenems and polymyxins) among these isolates. Methods: A systematic review was performed according to PRISMA criteria in the PUBMED/MEDLINE, Scopus, LILACS, SciELO, and Web of Science databases. Results: A total of 12 articles that evaluated 1006 clinical isolates of A. baumannii, all of which were resistant to carbapenems, were included. However, most isolates remained sensitive to polymyxins B and E (94.46%). The percentage of biofilm-producing isolates was high (96.3%), and in this study the relationship between the ability to produce biofilms and resistance to the analyzed antimicrobials is not clear. Conclusion: More studies should be conducted to monitor antimicrobial resistance in A. baumannii, especially in biofilm producers, as the therapeutic management of infections caused by these strains becomes more complex and challenging.

Introducción: Acinetobacter baumanni es un cocobacilo gramnegativo responsable de altas tasas de infecciones relacionadas con la salud. Tiene un alto nivel de resistencia intrínseca a los antimicrobianos, además de la capacidad de adquirir resistencia a los carbapenémicos y polimixinas. Además, A. baumannii tiene la capacidad de producir biopelículas en superficies abióticas y bióticas, lo que favorece la infección de pacientes críticos ingresados en unidades de cuidados intensivos (UCI). Cabe señalar que las bacterias involucradas en biofilms tienen mayor resistencia a los antimicrobianos, atribuida a factores bioquímicos y moleculares y a las condiciones de los hospedadores, lo que dificulta el tratamiento de estas infecciones. Objetivos: Evaluar la producción de biofilm por aislamientos de A. baumannii recuperados de pacientes de UCI, así como el perfil de susceptibilidad antimicrobiana (amino-glucósidos, tigeciclina, carbapenémicos y polimixinas) entre estos aislamientos. Métodos: Se realizó una revisión sistemática según los criterios Prisma en las bases de datos Pubmed / Medline, Scopus, Lilacs, SciELO y Web of Science. Resultados: Se incluyeron un total de 12 artículos que evaluaron 1006 aislamientos clínicos de A. baumannii, todos ellos resistentes a carbapenémicos. Sin embargo, la mayoría de los aislados permanecieron sensibles a las polimixinas B y E (94,46%). El porcentaje de aislamientos productores de biopelículas fue alto (96,3%), y en este estudio no está clara la relación entre la capacidad de producir biopelículas y la resistencia a los antimicrobianos analizados. Conclusión: Se deben realizar más estudios para monitorear la resistencia a los antimicrobianos en A. baumannii, especialmente en productores de biopelículas, ya que el manejo terapéutico de las infecciones causadas por estas cepas se vuelve más complejo y desafiante.

Avaliação do efeito antiaderente dos óleos essenciais de Eucalyptus globulus e Eucalyptus citriodora contra cepa de Staphylococcus aureus

Introdução: O biofilme dental é uma estrutura complexa formada a partir da adesão de variadas células microbianas à película adquirida sobre a estrutura dentária. Essas células se aderem umas às outras enquanto sintetizam uma matriz extracelular, tornando-se uma comunidade altamente organizada, o que dificulta sua remoção e promove uma resistência aos antimicrobianos. A presença de Staphylococcus aureus no biofilme oral pode causar um desequilíbrio na microbiota facilitando o início de um processo de doença. Objetivo: Avaliar a capacidade antiaderente do Eucalyptus globulus e Eucalyptus citriodora contra cepas de Staphylococcus aureus. Resultados: Foi possível observar que o óleo essencial de Eucalyptus globulus inibiu a formação do biofilme com uma concentração inibitória mínima de aderência (CIMA) semelhante ao digluconato de clorexidina 0,12 %, ambos de 1:8. O óleo essencial de Eucalyptus citriodora não impediu a aderência bacteriana às paredes do tubo em nenhuma concentração avaliada. Conclusão: Que apenas o óleo essencial da espécie Eucalyptus globulus possui atividade antiaderente contra Staphylococcus aureus, podendo ser utilizado como produto alternativo para controle do biofilme.

SUMMARY Introduction: Dental biofilm is a complex structure formed from the adhesion of various microbial cells to the film acquired on the dental structure. These cells adhere to each other while synthesizing an extracellular matrix, becoming a highly organized community, which makes it difficult to remove and promotes resistance to antimicrobials. The presence of Staphylococcus aureus in the oral biofilm can cause an disturb in the microbiota, facilitating the beginning of a disease process. Aim: To evaluate the non-adherent ability of Eucalyptus globulus and Eucalyptus citriodora against Staphylococcus aureus strains. Results: It was possible to observe that the essential oil of Eucalyptus globulus inhibited the formation of the biofilm with a Minimum Adhesive Inhibitory Concentration (MAIC) similar to 0.12 % chlorhexidine digluconate, both of 1:8. The essential oil of Eucalyptus citriodora did not prevent bacterial adherence to the tube walls in any evaluated concentration. Conclusion: Only the essential oil of the species Eucalyptus globulus has non-adherent activity against Staphylococcus aureus and can be used as an alternative product to control the biofilm.

Introducción: La biopelícula dental es una estructura compleja formada por la adhesión de varias células microbianas a la película adquirida en la estructura del diente. Estas células se adhieren entre sí mientras sintetizan una matriz extracelular, convirtiéndose en una comunidad altamente organizada, lo que dificulta su eliminación y promueve la resistencia a los antimicrobianos. La presencia de Staphylococcus aureus en el biofilm oral puede provocar un desequilibrio en la microbiota facilitando el inicio de un proceso patológico. Objetivo: Evaluar la capacidad antiadherente de Eucalyptus globulus y Eucalyptus citriodora frente a cepas de Staphylococcus aureus. Resultados: Se pudo observar que el aceite esencial de Eucalyptus globulus inhibió la formación de biopelículas con una concentración mínima inhibidora de adhesión (CIMA) equivalente al 0,12 % de gluconato de clorhexidina, ambos de 1:8. El aceite esencial de Eucalyptus citriodora no previno la adhesión bacteriana a las paredes del tubo en ninguna concentración evaluada. Conclusión: Que solo el aceite esencial de la especie Eucalyptus globulus tiene actividad anti-adherente contra Staphylococcus aureus, y puede usarse como producto alternativo para el control de biopelículas.

Antibacterial and anti-biofilm potential of Plectranthus amboinicus (Lour) Spreng essential oil and Carvacrol against Staphylococcus aureus and Escherichia coli / Potencial antibacteriano e anti-biofilme do óleo essencial de Plectranthus amboinicus (Lour) Spreng e carvacrol frente a Staphylococcus aureus e Escherichia coli

Introduction: Staphylococcus aureus and Escherichia coli are pathogens that cause chronic infections due to antibiotic resistance mechanisms and their ability to adhere to surfaces and to form biofilms. The search for new agents from natural resources to counter microbial biofilms is an urgent priority in healthcare. Objetive: chemical composition, antibacterial and anti-biofilm activity of Plectranthus amboinicus essential oil (PAEO) and carvacrol were investigated against E. coli and S. aureus. Methodology: PAEO was chemically analyzed using gas chromatography coupled to a mass spectrometer. Antimicrobial activity was assessed by the disc diffusion method and broth microdilution method to determine minimum inhibitory concentrations (MICs). Antibiofilm activity was investigated using 96-well plates with a crystal violet assay. Results: carvacrol (85.25%) was the major component of PAEO. The disc diffusion test confirmed the ability of PAEO and carvacrol in inhibiting bacteria in their planktonic form. The MICs of PAEO against S. aureus and E. coli were 0.31 and 1.25%, respectively, with bactericidal effect. Carvacrol demonstrated a significant antibacterial property (MIC = 0.31%), exhibiting bacteriostatic effects against S. aureus and bactericidal effects against E. coli. Carvacrol considerably inhibited E. coli biofilm formations (58.9%). Moreover, carvacrol inactivated the mature biofilms. Conclusion: the data obtained are promising, and facilitates the development of new therapeutic alternatives. These results indicate the potential of carvacrol in treating diseases caused by E. coli and S. aureus

Introdução: Escherichia coli e Staphylococcus aureus são patógenos que podem causar infecções persistentes devido aos mecanismos de resistência e à sua capacidade de aderir e formar biofilme. A busca por novos agentes a partir de recursos naturais para combater o biofilme é uma prioridade na área da saúde. Objetivo: a composição química, a atividade antibacteriana e anti-biofilme do óleo essencial de Plectranthus amboinicus (PAEO) e do carvacrol foram investigadas frente a S. aureus e E. coli. Metodologia: a análise química do PAEO foi realizada por cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massa. A atividade antimicrobiana foi avaliada por difusão em disco e microdiluição em caldo para determinar as concentrações inibitórias mínimas (CIMs). As atividades do anti-biofilme foram investigadas usando placas de 96 poços pelo ensaio de cristal violeta. Resultados: o carvacrol (85,25%) foi o principal componente do PAEO. A capacidade do PAEO e do carvacrol para inibir bactérias planctônica foi confirmada por difusão em disco. A CIM do PAEO para S. aureus e E. coli foi de 0,31 e 1,25%, respectivamente, com efeito bactericida. O carvacrol demonstrou uma propriedade antibacteriana significativa (CIM=0,31%), exibindo efeito bacteriostático frente a S. aureus e efeito bactericida para E. coli. O carvacrol inibiu significativamente a formação de biofilme de E. coli (58,9%) e promoveu a desestabilização do biofilme maduro. Conclusão: os dados obtidos são promissores, possibilitando o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas e revelam a potencialidade do carvacrol como fonte para o tratamento de doenças causadas por E. coli e S. aureus.

Comparative analysis of biofilm formation by Candida albicans and Candida krusei in different types of contact lenses / Análise comparativa da formação de biofilmes, por Candida albicans e Candida krusei, em diferentes tipos de lentes de contato

ABSTRACT Objective: To evaluate the Candida krusei and Candida albicans biofilm formation abilities on 5 different types of contact lenses and compare their metabolic activities and biomass. Methods: After biofilm formation by both the test species, their metabolic activity was assessed by the 2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide reduction assay with menadione, while the biomass was determined by staining with 0.4% crystal violet dye for further statistical analysis. Results: Both the Candida species could form biofilms on different types of contact lenses, with greater metabolic activities and lower biomass formation in rigid gas permeable lenses. Conclusion: Biofilm formation with greater metabolic activity and greater biomass were expected on soft contact lenses considering their surface hydrophobicity. However, the results demonstrated a greater metabolic activity on rigid contact lenses. This result has a great significance with regards to the increasing risk of microbial keratitis, although further studies are warranted to better elucidate the formation of biofilms on different types of contact lens materials in the future.

RESUMO Objetivo: Avaliar a capacidade de formação de bio­filmes de Candida krusei e Candida albicans em cinco tipos de lentes de contato, comparando atividade metabólica e biomassa dos mesmos. Métodos: Após a formação de biofilme de ambas as espécies, a atividade metabólica foi avaliada por ensaio de redução 2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-te­tra­zolium-5-carboxanilide com Menadiona, e a biomassa foi avaliada por coloração com Cristal Violeta 0,4% para posterior análise estatística. Resultados: Ambas as espécies de Candida foram capazes de formar biofilmes nos diferentes tipos de lentes de contato, havendo em lentes rígidas gás permeável maior atividade metabólica e menor biomassa formada. Conclusão: Esperava-se a obtenção de biofilmes de maior atividade metabólica e maior biomassa em lentes de contato gelatinosas com base no fundamento da Hidrofobicidade Superficial. Porém, o resultado apontou para maior atividade metabólica em lentes de contato rígidas. Apesar de observados resultados significativos, trata-se de um assunto de grande importância frente ao aumento do número de ceratites microbianas, mostrando-se necessários outros estudos para melhor elucidar a formação de biofilmes em diferentes tipos de materiais de lentes de contato.